人血栓调节蛋白基因编码片段的克隆及在真核细胞中的表达

来源 :中国普外基础与临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：adamsilei

【摘要】

：

目的构建人血栓调节蛋白(hTM)基因真核表达质粒,并导入两种真核细胞[非洲绿猴肾母细胞(COS-7细胞)和脐静脉内皮细胞(HUVECs)]中表达,为临床血栓病的基因治疗提供实验依据和物

【作者】

：

戴毅陈开邹琳张雪梅乔正荣时德

【机构】

：

川北医学院附属医院普外科,重庆医科大学医学检验系,重庆医科大学附属第一医院血管外科

【出处】

：

中国普外基础与临床杂志

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

血栓调节蛋白真核细胞重组质粒

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目的构建人血栓调节蛋白(hTM)基因真核表达质粒,并导入两种真核细胞[非洲绿猴肾母细胞(COS-7细胞)和脐静脉内皮细胞(HUVECs)]中表达,为临床血栓病的基因治疗提供实验依据和物质基础.方法采用PCR法扩增hTM基因的表达片段,HindⅢ+EcoRⅠ酶切后与pcDNA3.1(+)/neo质粒连接成pcDNA3.1/hTM.经鉴定确认后,由阳离子脂质体包裹转染COS-7细胞及HUVECs,RT-PCR和免疫组化法分别检测转染后细胞hTM的mRNA及蛋白的表达.结果双酶切及测序鉴定均证实hTM基因表达片

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