【摘 要】
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目的研究皮质酮是否可通过调节γ-氨基丁酸(GABA)受体影响神经细胞凋亡。方法体内实验:将健康雄性SD大鼠(8~9周龄,20只)制备慢性束缚应激高血糖模型,测定血清皮质酮水平。取
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室; 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室;
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目的研究皮质酮是否可通过调节γ-氨基丁酸(GABA)受体影响神经细胞凋亡。方法体内实验:将健康雄性SD大鼠(8~9周龄,20只)制备慢性束缚应激高血糖模型,测定血清皮质酮水平。取脑干进行HE染色观察显微结构,利用活化型Caspase-3免疫组化、TUNEL染色检测细胞凋亡。体外实验:NG108-15细胞(神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞系)经皮质酮(10-7 mol/L)作用后用免疫印迹法检测活化型Caspase-3含量。NG108-15细胞重组GABAB2受体后,用100μmol/L巴氯酚和100μmol/L CGP35348分别激动和拮抗GABAB受体,检测皮质酮(10-7 mol/L)作用下重组NG108-15细胞内活化型Caspase-3的表达量。结果慢性束缚应激高血糖大鼠脑干孤束核HE染色见异常细胞,免疫组化染色可见活化型Caspase-3阳性凋亡细胞、TUNEL染色也可见阳性细胞核,血清皮质酮呈现先升高后回落的趋势。体外培养NG108-15细胞表达GABAB1受体,其在皮质酮的作用下活化型Caspase-3表达量增高(P<0.05)。在皮质酮和巴氯芬作用下,重组NG108-15细胞活化型Caspase-3的表达量低于皮质酮和CGP35348作用下的活化型Caspase-3的表达量(P<0.05)。结论皮质酮对GABAB受体的抑制是导致神经细胞兴奋性水平的异常,从而引发凋亡的机制之一。
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