观察沉默载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B(APOBEC3B)基因对胰腺癌细胞PATU8988(购自美国典型菌种保藏中心)细胞周期、增殖及侵袭能力的影响。
方法通过构建重组靶向干扰APOBEC3B基因的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达质粒PGC-shRNA-APOBEC3B沉默APOBEC3B基因。分为空白对照组、阴性对照组及转染组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞APOBEC3B基因和蛋白的表达变化；流式细胞仪检测细胞周期的变化；平板克隆实验检测细胞增殖；Transwell侵袭实验检测细胞侵袭力。组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。
结果APOBEC3B基因和蛋白表达空白对照组为2.28±0.27和3.51±0.32，阴性对照组为2.32±0.21和3.33±0.29，转染组(0.26±0.09和0.31±0.12)明显低于上述两组(t＝6.230、5.640，P<0.01)；细胞周期结果显示G0/G1期与S期细胞空白对照组为(55.16±4.19)%、(31.21±1.92)%，阴性对照组为(52.35±3.53)%、(32.17±4.21)%，转染组为(75.12±5.34)%、(13.55±2.01)%，细胞周期阻止于G0/G1期(t＝5.230，P<0.01)，S期细胞数减少(t＝5.830，P<0.01)；平板克隆实验显示转染组细胞克隆形成数[(135.77±12.14)个]明显低于空白对照组和阴性对照组[(254.00±12.31)、(247.00±14.51)个，t＝11.210，P<0.01]；穿膜细胞数转染组[(92.41±18.42)个]明显低于空白对照组和阴性对照组[(215.00±23.83)、(227.00±21.25)个，t＝6.480，P<0.01]。
结论APOBEC3B基因沉默显著抑制SW1990细胞的增殖，减少S期细胞，降低细胞侵袭能力。