目的：探讨柴胡龙骨牡蛎汤对睡眠剥夺大鼠脑电活动、行为学和血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。方法：以改良的多平台水环境法剥夺大鼠睡眠复制失眠动物模型，以艾司唑仑为对照，将54只大鼠随机分为正常组、模型组、艾司唑仑组中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。睡眠剥夺持续21天，从造模第8天开始同时灌胃，其中柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组和艾司唑仑组分别根据用量给药，空白组和模型组以等量生理盐水灌胃。结束后观察并记录各组大鼠的一般情况变化；通过旷场实验、蔗糖水偏好实验探究各组大鼠行为学差异；采用脑电图仪检测脑电活动；采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测各组大鼠外周血中炎性因子[白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）]。结果：正常组大鼠精神状态佳，反应迅速敏捷，皮毛光亮，体重增长较快，模型组大鼠精神状态差，攻击性强，体重增长缓慢，与模型组比较，柴胡加龙骨牡蛎汤中剂量组和艾司唑仑组的体质量显著增加；旷场实验中，与正常组比较，模型组活动距离显著增加，静止时间减少，柴胡加龙骨牡蛎汤中剂量组和艾司唑仑组可明显减少睡眠剥夺大鼠活动距离，增加静止时间；蔗糖水偏好实验中，模型组大鼠的糖水偏好率较正常组显著降低，与模型组相比，柴胡加龙骨牡蛎汤中剂量组和艾司唑仑组糖水偏好率上升最显著；脑电监测后，与正常组相比，模型组Wake期时间明显增加，NREMS期、REMS期和总睡眠时间均显著减少，与模型组相比，艾司唑仑组与柴胡加龙骨牡蛎汤中剂量组Wake期持续时间减少最明显，NREMS期、REMS期和总睡眠时间均延长最显著；与正常组相比，模型组 IL-6和 TNF-α 含量显著升高，差异具有统计学意义，与模型组比较，柴胡加龙骨牡蛎汤中剂量组最显著降低大鼠血清中 IL-6、TNF-α水平，差异具有统计学意义。结论：柴胡加龙骨牡蛎汤可有效预防并改善睡眠剥夺模型大鼠睡眠时间和不良情绪，解除睡眠剥夺对机体的损害，且可能与调控外周炎性因子IL-6、TNF-α紧密关联，为临床使用柴胡加龙骨牡蛎汤治疗失眠提供参考。