【摘 要】
：
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表
【机 构】
：
130033长春,吉林大学中日联谊医院内镜中心,130033长春,吉林大学中日联谊医院内镜中心,130033长春,吉林大学中日联谊医院血管外科,130033长春,吉林大学中日联谊医院内镜中心
论文部分内容阅读
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表达;应用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖变化.结果 常氧条件下,与对照组比较,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射能显著增加A549细胞中Smac mRNA表达(P＜0.05),且乏氧能显著增加这种效应(P＜0.05);同时,Smac蛋白表达规律与mRNA表达规律相似.常氧和乏氧条件下,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射细胞均较相同时间点对照组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05);而且乏氧各组较常氧各组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05).结论 乏氧和辐射均能诱导A549细胞中Smac表达增加,且联合2 Gy照射能显著抑制乏氧条件下A549细胞的增殖能力。
其他文献
目的 观察负压封闭引流时负压值的大小对猪皮肤软组织感染金黄色葡萄球菌创面生长的影响.方法 猪皮肤软组织感染金黄色葡萄球菌创面模型,样本共32个,分别给予1 ～32编号,采用随机数字表法将32个创面模型随机分为4组,每组8个样本.负压值-10、-25、-50 kPa为治疗组,常规换药为对照组.作用时间均为72 h.取治疗前后创面中心及周围脓液稠厚处的脓液行细菌计数,并观察创面的一般情况.结果 与常规
目的 观察膜联蛋白A2(Annexin A2)和骨桥蛋白(OPN)在乳腺癌组织中的表达,探讨两者与乳腺癌发生发展的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测50例乳腺癌组织和癌旁组织中Annexin A2和OPN的表达水平,并分析两者与乳腺癌生物学行为的关系.结果 Annexin A2在乳腺癌组织中呈高表达(82.00％),在癌旁组织呈低表达(36.00％),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),A
目的 利用严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠肾包膜下移植法建立人前列腺增生(BPH)组织异种移植模型.方法 将20只4～6周龄SCID小鼠随机分为4组,每组5只.取前列腺术后组织标本,分别移植到小鼠肾包膜下和皮下.实验组为肾包膜下移植,对照组为皮下移植.8～12周后,观察前列腺组织生长,经石蜡包埋后进行常规染色和免疫组织化学鉴定.结果 人BPH组织在SCID小鼠肾包膜下成活率为90％ (18/20)
目的 观察突触后致密物质-95(PSD-95)多肽疫苗对大鼠神经病理性痛的影响.方法 成年雌性SD大鼠,制备保留性神经损伤(SNI)模型,7d后选取SNI模型成功的大鼠24只,随机分为4组(n=6):NP组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、匙孔虫戚血蓝蛋白(KLH)组及PSD-95组.PSD-95组沿背部两侧皮下多点注射PSD-95多肽疫苗3次,每隔2周注射1次；PBS、KLH组分别给予PBS和KLH.
目的 观察肿瘤性巨噬细胞(TAMs)在肿瘤微环境中对人结肠癌细胞侵袭性的影响.方法 模拟肿瘤微环境,分别通过Transwell共培养小室将TAMs(1×109/L)和结肠癌细胞Lovo(1×109/L)及SW480(1×109/L)进行共培养24h,收集TAMs 24 h的上清液加入Lovo(l×109/L)及SW480(1×109/L)中培养24 h,再经Transwell侵袭实验检测两株细胞的
目的 观察受体转谷氨酰胺酶(TG2)和Mer受体酪氨酸激酶(Mertk)共沉默的腺病毒干扰载体在小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块失稳中的作用.方法 建立小鼠AS模型,随机分为pAdTrack/TG2/Mertk组(n=10)、pAdTrack/TG2组(n=10)以及pAdTrack/Mertk组(n=10),于一侧髂总动脉斑块局部分别转染上述腺病毒干扰载体,另一侧髂总动脉转染pAdTrack/绿色荧
目的 探讨双向倒刺可吸收线在后腹腔镜肾盂输尿管成形术的安全性及可行性.方法 2011年3月至2013年6月,我院共实施35例腹腔镜肾盂输尿管成形术,其中采用普通5-0可吸收线行成形缝合术21例(A组),采用双向倒刺可吸收线缝合14例(B组).A组男12例,女9例,年龄6～18岁,平均年龄14.6岁；B组男8例,女7例.年龄7～ 25岁,平均年龄16.8岁.所有病例均经B超、三维CT尿路成像(CTU
由华中科技大学同济医学院附属同济医院、海峡两岸外科医学会、中国临床普外科前沿与争论高峰论坛组委会共同主办，大连医科大学附属第二医院承办的“2014中国临床普外科前沿与争论高峰论坛”定于2014年10月17日至19日在大连市隆重召开。欢迎全国普外科广大同仁踊跃投稿，积极参会。本次大会邀请中华外科杂志、中华普通外科杂志、中华肝胆外科杂志、中国实用外科杂志、中华消化外科杂志、中华实验外科杂志、中华胃肠外
目的 构建慢病毒介导的鼠细胞连接蛋白37(CX37)小干扰RNA (siRNA)及建立小鼠胃癌模型,将慢病毒转染进入鼠植入瘤并进一步分析植入瘤.方法 体外构建CX37的siRNA,抑制CX37 mRNA及蛋白的表达.60只植入瘤小鼠被随机分成3组:siRNA组、mock-siRNA组、盐水对照组.将siRNA、mock-siRNA及生理盐水分别注入瘤体.6周后采用半量逆转录-聚合酶链反应(RT-P
目的 观察沉默S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27(P27KiP1)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达调控及对膀胱癌细胞生长活性的影响,探讨其在肿瘤侵袭、凋亡中的作用机制.方法 采用Western blot法检测经腺病毒载体(Ad-Skp2)转染后膀胱癌细胞株EJ的Skp2、P27kip1和PTEN的表达改变;用细胞划痕实验、Boy