【摘 要】
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目的 探讨核转录因子2(Nrf2)在人脑胶质瘤细胞系U251的细胞增殖与肿瘤生长过程中的调控作用机制.方法 首先检测Nrf2在35例人脑胶质母细胞瘤与10例正常脑组织中的表达情况.通过构建质粒pEGFP-Nrf2和Si-Nrf2,进行细胞转染分别上调、下调U251中Nrf2的表达水平,并且筛选稳定转染细胞株.通过实时荧光定量PCR检测稳定转染细胞株Nrf2及其下游因子的转录水平,CCK-8检测其在
【机 构】
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210002南京大学医学院临床学院神经外科,210002南京大学医学院临床学院神经外科,210002南京大学医学院临床学院神经外科,210002南京大学医学院临床学院神经外科,210002南京大学医学
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目的 探讨核转录因子2(Nrf2)在人脑胶质瘤细胞系U251的细胞增殖与肿瘤生长过程中的调控作用机制.方法 首先检测Nrf2在35例人脑胶质母细胞瘤与10例正常脑组织中的表达情况.通过构建质粒pEGFP-Nrf2和Si-Nrf2,进行细胞转染分别上调、下调U251中Nrf2的表达水平,并且筛选稳定转染细胞株.通过实时荧光定量PCR检测稳定转染细胞株Nrf2及其下游因子的转录水平,CCK-8检测其在体外增殖活性,再将其种植于裸鼠皮下观察其增殖情况,最后取种植瘤块进行免疫组化染色,检测Nrf2、Ki67、Caspase-3与CD31的表达.结果 35例人胶质母细胞瘤中有29例表达Nrf2,阳性率为82.9％.上调Nrf2表达水平后,血红素氧化酶(HO)-1与醌氧化还原酶(NQO)-1转录水平上调,细胞增殖较快,移植瘤生长快,瘤块重(2.06±0.16)g,Ki67与CD31表达增加,Caspase-3表达较低.而下调Nrf2表达水平后,HO-1与NQO-1转录水平下降,细胞增殖较慢,移植瘤生长慢,瘤块重(0.29±0.03)g,Ki67与CD31表达较低,Caspase-3表达增加.结论 Nrf2可能通过调控HO-1及NQO-1促进U251的增殖,并通过促进肿瘤细胞分裂、抑制肿瘤细胞凋亡、促进血管形成来促进胶质瘤的生长。
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