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研究方格星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharide, SNP)对HUVEC细胞电离辐射损伤的保护作用。
方法采用CCK-8法测定137Cs γ射线照射的SNP预处理HUVEC细胞的存活率,筛选获得137Cs γ射线的最佳辐照剂量为8 Gy,SNP的最佳处理浓度为100 g/ml。采用克隆形成法检测SNP预处理后HUVEC细胞的辐照敏感性。采用Hoechst33342和PI双染色法及流式细胞术测定HUVEC细胞凋亡情况。
结果HUVEC细胞存活率随辐射剂量增大而显著下降(P<0.01);而经一定浓度的SNP预处理后,HUVEC细胞存活率显著上升,且与浓度呈正相关(P<0.01),当SNP终浓度为100 μg/ml时,存活率最高,由照射后的63.43%上升至84.96%(P<0.01);SNP预处理组的细胞克隆形成率显著高于未处理组(P<0.01)。与辐照模型组相比,SNP预处理的细胞凋亡率和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平均显著下降,其中凋亡率由15.6%降至6.8%,ROS水平由47.10×104降至41.77×104,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Hoechst33342着色的蓝色荧光和PI着色的红色荧光也显著降低(P<0.01)。
结论SNP预处理能提高照射后细胞存活率和克隆形成率,有效降低辐射诱导的细胞凋亡和细胞内ROS水平,表明SNP对电离辐射所致的HUVEC细胞损伤具有较好的保护作用。