【摘 要】
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探讨腺苷酸环化酶在急性髓系白血病细胞分化中的作用和表达调控机制,为白血病的防治提供理论依据.方法培养急性髓系白血病NB细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增,以RT-PCR扩增产物
【机 构】
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滨州医学院 山东 烟台264003
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探讨腺苷酸环化酶在急性髓系白血病细胞分化中的作用和表达调控机制,为白血病的防治提供理论依据.方法培养急性髓系白血病NB细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增,以RT-PCR扩增产物为模板,根据设计的白血病相关的基因引物进行基因扩增,构建重组腺苷酸环化酶重组表达载体,干扰质粒和报告基因质粒,经细胞转染后,构建腺苷酸环化酶稳定表达细胞株,对表达的蛋白进行免疫印迹和荧光素酶检测,测定cAMP的含量.结果腺苷酸环化酶在NB细胞中表达的高表达且能明显提升细胞内的cAMP水平.MiR-142-3p在在NB细胞中的表达与腺苷酸环化酶呈反相关,CEBPα能抑制MiR-142-3p的表达水平.结论MiR-142-3p在抑制腺苷酸环化酶蛋白的表达的同时受到CEBPα的调控,cAMP信号通路在ATRA诱导急性髓系白血病细胞分化中起到重要作用.
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