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摘要：目的：探讨原发性失眠障碍患者和正常人群肠道菌群的差异方法：选取2018年1月-2019年1月暨南大学附属第一医院睡眠医学中心募集了20名原发性失眠障碍的患者和正常对照人群，并收集了他们的粪便样本，进行了16S rDNA测序分析，采用R语言进行a多样性分析和Anosim相似性检验。结果：原发性失眠障碍组肠道菌群。多样性分析中Chao指数和Shannon指数明显低于正常对照人群（p<0.01）。Anosim相似性分析中二组的Statistic R：0.1944>0，组间差异显著大于组内差异，且差异具有统计学意义（p<0.01）。结论：原发性失眠障碍人群与正常对照人群的肠道菌群结构上存在显著差异。
关键词：原发性失眠障礙;肠道菌群;菌群多样性;相似性分析
中图分类号：R256.23.文献标识码：A 文章编号：2096-5249（2019）04-043-002
失眠障碍主要以入睡困难、易早醒已经难以维持睡眠为三大主要症状，近年来已经愈发成临床最常见的睡眠障碍之一。根据2015年流行病的调查，失眠障碍在我国成年人群中发病率已经高达15.1%（95%Ch 13.5%～16.7%）。而且，不仅仅局限于睡眠症状，失眠障碍还会显著增加其他精神障碍和心脑血管的发病风险，为国家、社会和个人造成了沉重的负担。然而，目前对于失眠障碍的机制研究仍上为明确。近年来，越来越多的证据表明肠道菌群的紊乱与多种疾病存在密切的相关，如肥胖、高血压、帕金森疾病等。因此本研究重点讨论失眠障碍的患者与正常人群肠道菌群的差异性，为失眠障碍的机制研究提供依据，对未来希望利用菌群靶向治疗失眠障碍具有重要意义。
1研究对象和方法
1.1研究对象本研究经过暨南大学伦理委员会批准，选取2018年1月-2019年1月暨南大学附属第一医院睡眠医学中心门诊及病房按照ICSD-3的慢性失眠障碍诊断标准招募受试者人群（原发性失眠障碍患者和正常对照者各10名）。
1.2研究方法在清洁的环境下，使用无菌样本采集管收集所有受试者的粪便，取样后立即送往-80度冰箱贮存。使用Illumina HiSeq 2500测序平台进行二代测序。本研究采用R
3.5.1.Version进行统计，检验方法采用T检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1.a多样性分析失眠障碍患者与正常对照组的Chao指数分别为1823.6±192.2，2054.4±148.4，两组Chao指数差异有统计学意义（p<0.01）见表1.失眠障碍患者与正常对照组的Shannon指数分别为5.4±0.6，6.0±0.4，两组Shannon指数差异有统计学意义（p<0.05）。见表2：
2.2.Anosim相似性检验本研究使用失眠障碍患者和正常对照者的原始数据进Anosim相似性检验分析，根据蒙特卡洛置换检验，计算得Statistic R：0.1944>0，证明二者的组间差异大于组内差异，且差异具有统计学意义（p<0.001）。
3讨论
本研究在国内首次严格按照Diagnostic Interview forSleep Patterns and Disorder（DISP）会晤检查和ICSD-3的慢性失眠障碍诊断标准，募集了原发性失眠障碍患者，并利用新型二代基因测序技术，证明了原发性失眠障碍的患者和正常人群的肠道菌群在结构上存在显著差异。其中，失眠障碍患者在a多样性分析中较正常人群表现出较低的Chao指数和Shannon指数，提示失眠患者肠道菌群的多样性较低。这种菌种多样性的降低，可能会引起短链脂肪酸的减少，比如乙酸、丙酸和丁酸。这些物质对于维持机体免疫和健康具有非常重要的意义。尤其是丁酸的生成减少，可能会引起肠道内γ-氨基丁酸的生成的减少，从而降低经肠道进入血液循环的γ-氨基丁酸的摄取，对于促进机体入睡有着不利的影响。同时失眠障碍的患者机体的免疫和健康会进一步下降，这些会进而加剧肠道菌群多样性的降低，从而陷入恶性循环。这也从侧面解释了，为什么失眠障碍的患者难以有效治疗，并且存在长期患病的状态，极难自愈，对个人、社会和家庭造成严重的影响。当然本研究还存在样本量较低的不足，没有选择双盲的入组方法，存在着一定的局限性，还需要进行多中心、大样本的进一步研究。
关键词：原发性失眠障礙;肠道菌群;菌群多样性;相似性分析
中图分类号：R256.23.文献标识码：A 文章编号：2096-5249（2019）04-043-002
失眠障碍主要以入睡困难、易早醒已经难以维持睡眠为三大主要症状，近年来已经愈发成临床最常见的睡眠障碍之一。根据2015年流行病的调查，失眠障碍在我国成年人群中发病率已经高达15.1%（95%Ch 13.5%～16.7%）。而且，不仅仅局限于睡眠症状，失眠障碍还会显著增加其他精神障碍和心脑血管的发病风险，为国家、社会和个人造成了沉重的负担。然而，目前对于失眠障碍的机制研究仍上为明确。近年来，越来越多的证据表明肠道菌群的紊乱与多种疾病存在密切的相关，如肥胖、高血压、帕金森疾病等。因此本研究重点讨论失眠障碍的患者与正常人群肠道菌群的差异性，为失眠障碍的机制研究提供依据，对未来希望利用菌群靶向治疗失眠障碍具有重要意义。
1研究对象和方法
1.1研究对象本研究经过暨南大学伦理委员会批准，选取2018年1月-2019年1月暨南大学附属第一医院睡眠医学中心门诊及病房按照ICSD-3的慢性失眠障碍诊断标准招募受试者人群（原发性失眠障碍患者和正常对照者各10名）。
1.2研究方法在清洁的环境下，使用无菌样本采集管收集所有受试者的粪便，取样后立即送往-80度冰箱贮存。使用Illumina HiSeq 2500测序平台进行二代测序。本研究采用R
3.5.1.Version进行统计，检验方法采用T检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1.a多样性分析失眠障碍患者与正常对照组的Chao指数分别为1823.6±192.2，2054.4±148.4，两组Chao指数差异有统计学意义（p<0.01）见表1.失眠障碍患者与正常对照组的Shannon指数分别为5.4±0.6，6.0±0.4，两组Shannon指数差异有统计学意义（p<0.05）。见表2：
2.2.Anosim相似性检验本研究使用失眠障碍患者和正常对照者的原始数据进Anosim相似性检验分析，根据蒙特卡洛置换检验，计算得Statistic R：0.1944>0，证明二者的组间差异大于组内差异，且差异具有统计学意义（p<0.001）。
3讨论
本研究在国内首次严格按照Diagnostic Interview forSleep Patterns and Disorder（DISP）会晤检查和ICSD-3的慢性失眠障碍诊断标准，募集了原发性失眠障碍患者，并利用新型二代基因测序技术，证明了原发性失眠障碍的患者和正常人群的肠道菌群在结构上存在显著差异。其中，失眠障碍患者在a多样性分析中较正常人群表现出较低的Chao指数和Shannon指数，提示失眠患者肠道菌群的多样性较低。这种菌种多样性的降低，可能会引起短链脂肪酸的减少，比如乙酸、丙酸和丁酸。这些物质对于维持机体免疫和健康具有非常重要的意义。尤其是丁酸的生成减少，可能会引起肠道内γ-氨基丁酸的生成的减少，从而降低经肠道进入血液循环的γ-氨基丁酸的摄取，对于促进机体入睡有着不利的影响。同时失眠障碍的患者机体的免疫和健康会进一步下降，这些会进而加剧肠道菌群多样性的降低，从而陷入恶性循环。这也从侧面解释了，为什么失眠障碍的患者难以有效治疗，并且存在长期患病的状态，极难自愈，对个人、社会和家庭造成严重的影响。当然本研究还存在样本量较低的不足，没有选择双盲的入组方法，存在着一定的局限性，还需要进行多中心、大样本的进一步研究。