猪囊虫病疫苗用SOA工程菌的培养与发酵工艺

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以摇床振荡培养猪囊虫病疫苗用SOA工程菌,确定了其最佳培养条件:培养基为含0.2%葡萄糖的LB磷酸盐复合培养基(pH7.4),诱导剂为1%乳糖,培养温度为37℃。以此为基础进行工艺放大,研究了SOA工程菌在70L国产发酵罐中的发酵培养工艺,确定了接种量、pH、气压、溶解氧、温度等参数。试验结果显示,种子罐细菌量为OD600=4.0时,接种到发酵罐的菌体收获量最高;罐体气压在0.05~0.25MPa之间变动对工程菌产量、活菌数及表达量等均无明显影响;整个发酵过程中,发酵条件比较稳定,pH为7.4~7.0,溶解氧保持在100以上,温度36~38℃,发酵时间8~10h。发酵结束,发酵液OD600高达11.2,活菌数为103亿/mL,表达量为16.2%,重组质粒稳定。
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