【摘 要】
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研究虫草素在体外抑制胰腺癌干细胞增殖及转移作用,并初步探讨其作用机制。MTT法检测不同浓度虫草素对胰腺癌干细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞的形态变化;碘化丙啶(PI
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研究虫草素在体外抑制胰腺癌干细胞增殖及转移作用,并初步探讨其作用机制。MTT法检测不同浓度虫草素对胰腺癌干细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞的形态变化;碘化丙啶(PI)单染法检测虫草素的凋亡诱导作用;细胞划痕愈合实验检测细胞迁移能力;RT-PCR和Western blot检测细胞凋亡基因及细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因的表达水平。结果表明,虫草素对胰腺癌干细胞具有显著增殖抑制及凋亡诱导作用,24和48 h的半数有效抑制浓度(IC50)分别为107.364和48.472μmol·L-1;细胞划痕愈合实验发现虫草素能抑制细胞的迁移能力;对凋亡相关基因及蛋白的分析发现,虫草素处理胰腺癌干细胞后,抗凋亡基因Bcl-2表达下调,促凋亡基因Bax表达上调,同时检测到caspase-3和p53被显著激活;进一步对细胞EMT相关基因分析发现,60μmol·L-1虫草素作用24 h后,E-cadherin表达被上调,N-cadherin表达下调,相对表达量分别为2.19和0.36。可见,虫草素不仅有效抑制胰腺癌干细胞增殖和诱导凋亡,还能明显减弱其迁移能力,并提示其作用机制可能与激活p53信号通路与逆转肿瘤细胞EMT有关,这为靶向胰腺癌干细胞治疗胰腺癌提供新的思路和理论基础。
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