小鼠OX40真核表达载体的构建及表达

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目的构建小鼠OX40的真核表达载体。方法从ConA活化的小鼠牌淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA,并将其克隆到PUCm-T载体,经PCR、酶切和测序分析证实,进而脂质体法转染HUVECS,G418筛选,RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株。结果构建的pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体经PCR、酶切和测序分析,证实该片段与GeneBank记载的小鼠OX40cDNA序列完全一致。筛选获得能表达小鼠OX40蛋白的HUVECs转基因细胞
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