【摘 要】
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目的克隆和表达假单胞菌菌株Pseudomonas monteilii CCTCC M2013683的单加氧酶基因并研究其在手性亚砜合成中的应用。方法根据假单胞菌菌株Pseudomonas monteilii CCTCC M201
【机 构】
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遵义医学院药学院,遵义医学院基础医学院生物化学教研室
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目的克隆和表达假单胞菌菌株Pseudomonas monteilii CCTCC M2013683的单加氧酶基因并研究其在手性亚砜合成中的应用。方法根据假单胞菌菌株Pseudomonas monteilii CCTCC M2013683基因组序列,选取3个单加氧酶基因设计特异性的PCR引物,利用PCR技术,以菌株基因组DNA为模板扩增基因片段,构建重组质粒p ET-32a-pmmo,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白。以构建的重组菌为生物催化剂,苯甲硫醚为底物进行催化反应。结果扩增获得了3个目的基因并构建了相应的重组质粒,诱导表达的3个重组蛋白中有2个(pmmo-3546、pmmo-6814)具有活性,可催化苯甲硫醚转化为R构型的苯甲亚砜。结论成功获得了具有R-选择性催化苯甲硫醚活性的单加氧酶重组蛋白。
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