重组穿梭质粒pAdTrack—CMV—PGC1α的构建及鉴定

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目的构建编码小鼠PGC1α基因的质粒,为进一步研究定向诱导PGC1α在白色脂肪组织特异性表达做准备。方法提取小鼠肾脏总RNA,利用RT—PCR扩增目的基因,引物设计时在两端分别引入EcoRV和Sal Ⅰ的酶切位点,双酶切后与经过同样处理的穿梭质粒载体pAdTrack-CMV相连,经酶切和PCR鉴定。结果通过RT—PCR获取了目的基因并成功克隆入载体,目的基因序列与GENEBANK报道序列一致。结论构建出编码小鼠PGC1α基因的重组质粒pAdTrack—CMV—PGC1α。
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