【摘 要】
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为研究制备单链DNA的方法,根据GenBank已发表的PCV-2全基因组序列,设计合成2条特异性引物和1条通用引物,通过pGM-T-PCV-2重组质粒的构建、引物浓度优化、单链PCR产物的杂交测
【机 构】
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四川农业大学动物医学院,西北农林科技大学动物医学院,中国检验检疫科学研究院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室
【基金项目】
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教育部《长江学者和创新团队发展计划》创新团队项目（IRT0848）, 四川农业大学双支计划
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为研究制备单链DNA的方法,根据GenBank已发表的PCV-2全基因组序列,设计合成2条特异性引物和1条通用引物,通过pGM-T-PCV-2重组质粒的构建、引物浓度优化、单链PCR产物的杂交测序鉴定,以及敏感性和特异性试验,对PCV-2不对称PCR方法进行了研究。结果显示,上、下游引物用量比为20∶1～40∶1时,可明显扩增出457 bp大小的单链和双链特异性目的片段,不对称PCR敏感性和对称PCR相一致,CSFV、PRV、PPV核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。PCV-2不对称PCR方法的建
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