【摘 要】
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根据正交试验设计的原理．设计了探索性正交试验和细调性正交试验来确定沙打旺ISSR-PCR体系中各成分的浓度。得到既稳定又能扩出最多条带的适合沙打旺的ISSR-PCR最佳反应体系，即
【机 构】
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全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心,四川农业大学动物科技学院草业科学系
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根据正交试验设计的原理．设计了探索性正交试验和细调性正交试验来确定沙打旺ISSR-PCR体系中各成分的浓度。得到既稳定又能扩出最多条带的适合沙打旺的ISSR-PCR最佳反应体系，即20m的反应体系中含有1×buffer，dNTP0．2mmol／L，Taq酶1．0U，引物0．3μmol／L，Mg^2＋ 2．5mmol／L，DNA模板2．5ng／出。然后对沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验，得到这条引物的最佳退火温度为54．1℃。这一最佳体系的建立为今后利用ISSR标记技术，研究沙打
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