【摘 要】
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为了探究非洲猪瘟病毒(ASFV)A137R蛋白的表达动力学与亚细胞定位,本研究构建了原核表达质粒pGEX-6p-1-A137R,表达与纯化了 A137R蛋白,并制备了针对该蛋白的多克隆抗体.经间接免疫荧光试验(IFA)分析,抗体效价达1 ∶25 600;Western-blotting和IFA证实,该多克隆抗体具有良好的反应性和特异性.利用该抗体分析了 ASFV感染原代猪肺泡巨噬细胞中A137R蛋白的表达动力学及其亚细胞定位,发现A137R蛋白为晚期蛋白,主要定位于细胞质,且与ASFV的结构蛋白p72共定
【机 构】
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长江大学动物科学学院,湖北荆州 434023;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨 150069;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔
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为了探究非洲猪瘟病毒(ASFV)A137R蛋白的表达动力学与亚细胞定位,本研究构建了原核表达质粒pGEX-6p-1-A137R,表达与纯化了 A137R蛋白,并制备了针对该蛋白的多克隆抗体.经间接免疫荧光试验(IFA)分析,抗体效价达1 ∶25 600;Western-blotting和IFA证实,该多克隆抗体具有良好的反应性和特异性.利用该抗体分析了 ASFV感染原代猪肺泡巨噬细胞中A137R蛋白的表达动力学及其亚细胞定位,发现A137R蛋白为晚期蛋白,主要定位于细胞质,且与ASFV的结构蛋白p72共定位.本研究为进一步解析ASFVA137R蛋白的功能奠定了基础.
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