观察LMO1在胃癌组织和人胃癌细胞株中的表达水平,探讨LMO1基因沉默对人胃癌MKN28细胞侵袭转移的影响。
方法采用免疫组化技术检测30例胃癌和癌旁组织中LOM1蛋白表达。实时定量PCR和Western blot检测人胃癌细胞株AGS﹑BGC-823、SGC-7901、MKN28和正常人胃黏膜上皮细胞GES中LMO1 mRNA和蛋白表达及LMO1特异性siRNA对LMO1 mRNA和蛋白表达的影响。Transwell小室实验检测MKN28侵袭转移能力,Western blot检测E-钙黏蛋白、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达。
结果胃癌组织中LMO1蛋白表达阳性率(77%)高于癌旁组织(17%)(χ2=21.70,P<0.01)。淋巴结转移阳性胃癌患者LOM1蛋白阳性率高于无淋巴结转移患者(χ2=5.83,P=0.02)。胃癌细胞株AGS﹑BGC-823﹑SGC-7901﹑MKN28的LMO1mRNA和蛋白表达水平均较正常人胃黏膜上皮细胞GES升高,以MKN28细胞升高最为明显(均P<0.01)。与阴性转染组比较,LMO1-siRNA转染组LMO1 mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.01)。LMO1基因沉默降低了胃癌MKN28细胞的侵袭转移能力(t=-11.53, P<0.01;t=-10.68, P<0.01)。与阴性转染组比较,LMO1-siRNA转染组E-钙黏蛋白表达水平升高,MMP-9和VEGF表达水平降低(均P<0.01)。
结论LMO1基因在胃癌组织和胃癌细胞株中高表达,可能通过调控E-钙黏蛋白、MMP-9和VEGF表达参与胃癌的侵袭转移过程。