【摘 要】
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目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转染骨髓源性血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)后,EPC分泌VEGF及活性以及EPC特性的影响.方法 体外获取大鼠骨髓,分离单个核细胞,经培养,鉴定为EPC.用脂质体介导pcDNA3.0-hVEGF165转染,转染后ELISA法测培养上清VEGF
【机 构】
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215004,苏州大学附属第二医院血管外科,215004,苏州大学附属第二医院血管外科,215004,苏州大学附属第二医院血管外科
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目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转染骨髓源性血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)后,EPC分泌VEGF及活性以及EPC特性的影响.方法 体外获取大鼠骨髓,分离单个核细胞,经培养,鉴定为EPC.用脂质体介导pcDNA3.0-hVEGF165转染,转染后ELISA法测培养上清VEGF蛋白水平,培养上清液对ECV304细胞生长的影响,以评价VEGF蛋白活性,MTT法评价转染对细胞活性的影响,免疫细胞化学检测EPC表达VEGF、vWF(血友病因子)、VEGF-R2(血管内皮生长因子受体2)的变化.结果 转染后的第7天表达的VEGF蛋白浓度达1280 pg/ml,转染对EPC的增殖无影响,表达VEGF、vWF、VEGF-R2的比率随时间而逐渐升高,至第7天时分别为88.52%、82.65%和95.97%.结论 VEGF转染的EPC能表达一定浓度有功能的VEGF蛋白,能帮助EPC保持内皮细胞特性,向成熟内皮细胞分化。
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