【摘 要】
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【目的】观察槐定碱对肺腺癌A549细胞耐药性和敏感性的影响。【方法】(1)将肺腺癌A549细胞随机分为对照组、槐定碱组、顺铂组和槐定碱+顺铂组。对照组常规培养,槐定碱组和顺铂组分别加入40μmol/L的槐定碱和2.0 nmol/L的顺铂,槐定碱+顺铂组同时加入40μmol/L槐定碱和2.0 nmol/L顺铂,处理24 h后,平板克隆实验测定细胞集落形成能力,流式细胞仪测定细胞凋亡率。(2)将肺腺癌
【基金项目】
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河北省医学科学研究课题计划项目(编号:20200465);
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【目的】观察槐定碱对肺腺癌A549细胞耐药性和敏感性的影响。【方法】(1)将肺腺癌A549细胞随机分为对照组、槐定碱组、顺铂组和槐定碱+顺铂组。对照组常规培养,槐定碱组和顺铂组分别加入40μmol/L的槐定碱和2.0 nmol/L的顺铂,槐定碱+顺铂组同时加入40μmol/L槐定碱和2.0 nmol/L顺铂,处理24 h后,平板克隆实验测定细胞集落形成能力,流式细胞仪测定细胞凋亡率。(2)将肺腺癌A549细胞随机分为对照(control)组,抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)组、抑制剂(inhibitor)组、槐定碱+inhibitor-NC组、槐定碱+inhibitor组、槐定碱组,相应干预后,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞中miR-216a-5p和锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)mRNA表达,双荧光素酶报告基因系统验证miR-216a-5p与ZEB1的靶向关系,Western Blot法检测细胞中ZEB1、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。【结果】(1)与对照组比较,槐定碱组、顺铂组和槐定碱+顺铂组细胞集落数均减少,细胞凋亡率升高(均P<0.05);槐定碱+顺铂组细胞集落数少于槐定碱组和顺铂组,细胞凋亡率高于槐定碱组和顺铂组(均P<0.05)。(2)与control组和inhibitor-NC组比较,inhibitor组miR-216a-5p表达及Bax蛋白表达降低,ZEB1 mRNA和蛋白及Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05);与control组比较,槐定碱组miR-216a-5p表达及Bax蛋白表达水平升高,ZEB1 mRNA和蛋白及Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05);与inhibitor组比较,槐定碱+inhibitor组miR-216a-5p表达及Bax蛋白表达水平升高,ZEB1 mRNA和蛋白及Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05);与槐定碱组、槐定碱+inhibitor-NC组比较,槐定碱+inhibitor组miR-216a-5p表达及Bax蛋白表达水平降低,ZEB1 mRNA和蛋白及Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-216a-5p可靶向调控ZEB1表达。【结论】槐定碱可增强A549细胞对顺铂的敏感性,亦可通过上调miR-216a-5p靶向降低ZEB1表达,发挥抗肺腺癌作用。
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