肾癌相关基因克隆——肾癌cDNA消减文库的构建

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:janmey2007
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应用抑制性消减杂交技术,构建人肾癌与正常肾差异表达的cDNA消减文库,分别从肾癌及正常肾功能系中提取ply(A)^+RNA,依次合成单链及双链cDNA,经酶切成平均大小为400-600bp的片段,将肾癌cDNA分为两组,分别与两种不同的接头衔接,再与正常肾cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接构建成功cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增。构建成功具有高消减效率
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