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目的 构建人PCKl基因的真核表达载体。方法 以人内脏脂肪细胞cDNA为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增PCK1基因编码区的全部序列，克隆人pGEM—T载体中，经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后，定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1（＋）中，并进行双酶切鉴定。结果 PCR扩增的特异性片段长度为l972bp，以此构建的pGEM—T—PCK1克隆载体，经限制性内切酶酶切证实载体中带有PCK1基因的目的片段，与GenBank中的人PCK1基因cDNA序列一致。重组质粒pcDNA3．1-PCKl