抗转化生长因子β1的U1 snRNA嵌合型核酶体外剪切作用

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frankyfeng
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目的:研究抗转化生长因子β1U1 snRNA嵌合型锤头状核酶的细胞外切割活性。方法:通过计算机设计针对TGFβ1的锤头状核酶,然后把合成的核酶片段克隆入含有U1 snRNA启动子/增强子和终止子的u1snRNA核酶载体中。通过RT—PCR扩增获得TGFβ1的部分基因片段,将其克隆入T载体中,17启动子的下游,体外转录获得核酶和靶RNA,转录过程中掺入同位素,通过变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化回收。[^32P]标记的核酶与靶RNA在不同条件下进行切割反应,变性PAGE电泳,放射自显影,分析反应结果。结果:活性
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