位点饱和突变揭示青霉素酰化酶αR145和αF146亚基在β-内酰胺类抗生素合成中的重要性Jager SAW等

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大肠杆菌表达的重组青霉素酰化酶能催化青霉素和头孢菌素类的衍生母核加上一个乙酰基,工业上常利用这一催化反应来生产β-内酰胺类抗生素。通过分析青霉素酰化酶的晶体结构发现,当大的配基结合到活性中心时,αR145-αF146位点发生换位。经过定点饱和突变得到38个突变体,其中不少于33个突变体的催化效率有所提高。部分突变体在低底物浓度下的最高催化效率较对照提高了1.5倍,且催化过程中合成对水解反应的比例提高了5~15倍。在高底物浓度条件下,αR145G、αR145S、αR145L三个突变子较野生青霉素酰化酶的合成
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