中药牛骨髓中蛋白与多肽提取方法的比较研究

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目的研究中药牛骨髓中蛋白、多肽类成分的提取方法、结构信息及其抗菌活性,提高药用价值。方法采用10种提取和3种制备方法,以蛋白含量、提取率、水解度、抗菌活性和相对分子质量等为考察指标,筛选牛骨髓蛋白与多肽的最佳提取和制备部位方法。结果水、NaCl溶液和Tris-HCl溶液提取法得到的蛋白综合指标较高,其蛋白量分别为(52.20±0.58)、(50.19±0.21)、(43.21±0.05)mg/m L,抗菌活性的强弱与蛋白量高低有一定的关系;电泳图谱显示,牛骨髓蛋白样品具有2级谱带,分别为蛋白谱带(66 000)与多肽谱带(4 10010 000);LC/MS数据显示,水提、0.5 mol/L NaCl和30%(NH42SO4部位多肽相对分子质量分别为1 027.849 916.32、1 131.174 989.95、1 150.469 917.00,与其电泳谱带基本吻合。结论水提法操作较简单、快速、成本低,适合于工业化生产;采用SDS-PAGE和LC/MS对牛骨髓蛋白进行分析,为构建其指纹图谱提供理论依据。
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