酵母双杂交RRS筛选系统对已知蛋白间相互作用的验证

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：linnber

【摘要】

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目的：通过一对已知蛋白Pak和Chp间的相互作用介绍酵母双杂交RRS筛选系统,以期将此系统更广泛的用于蛋白间相互作用的研究。方法：挑选酵母温度缺陷株cdc25-2的低回复突变单克隆,

【作者】

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王琪张静田杰张晖

【机构】

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重庆医科大学附属儿童医院心血管内科

【出处】

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重庆医科大学学报

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

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酵母双杂交系统 Ras恢复系统蛋白相互作用 Yeast two-hybrid system Ras recruitment system Interactio

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30300299）

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目的：通过一对已知蛋白Pak和Chp间的相互作用介绍酵母双杂交RRS筛选系统,以期将此系统更广泛的用于蛋白间相互作用的研究。方法：挑选酵母温度缺陷株cdc25-2的低回复突变单克隆,醋酸锂法制备酵母感受态细胞。重组质粒Met425-Myc-Ras-Pak单独转化酵母,排除诱饵蛋白的自激活作用。将两重组质粒Met425-Myc-Ras-Pak和Ura-M-ChpAc共转化酵母,设置不同质粒组合和不同培养基平板作为对照,观察酵母在36℃的生长情况。结果：制备感受态的cdc25-2细胞无回复突变发生。质粒Met

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