HPV16 E7蛋白编码基因原核表达与鉴定

来源 :四川大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xwg1217

【摘要】

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目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制，对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板，采用PCR方法扩增HPV

【作者】

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施桥发王保宁李虹魏晓丽张卫东曹康蒋忠华李明远

【机构】

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四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室,新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,成都医学院病原生物学教研室

【出处】

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四川大学学报：医学版

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

HPV16 原核表达 SDS—PAGE 免疫印迹 Human papillomavirus type 16（HPV16） Prokaryotic Express

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目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制，对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板，采用PCR方法扩增HPV16E7基因，经BamH Ⅰ和Hind Ⅱ双酶切后插入相同酶切pET32a（＋）载体，转化JM109感受态细胞，并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达，SDS—PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32／E7，HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21

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