H CM V 兔胚肺细胞体外感染模型的建立

来源 :山东医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haiyang1979
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为探讨人巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMW)AD169毒株体外感染兔胚肺细胞(RabbitEmbryoLungcel,REL)的敏感性,建立HCMVAD169毒株感染模型,将HCMVAD169毒株定量接种于REL,观察细胞病理变化;用单克隆抗体-免疫组化方法检测细胞内HCMV抗原;电镜检测细胞内病毒颗粒,用ELISA方法检测经REL增殖病毒培养物HCMV抗原滴度,用人胚肺细胞(HumanEmbryoLungcel,HEL)滴定病毒毒力变化。结果表明,接种病毒后,REL于48h出现细胞肿胀,胞浆内出现折光性颗粒,逐渐变圆、脱落,其病变特征与该病毒在HEL增殖出现的病变一致;用免疫组化法在胞浆及其核内查到HCMV抗原;用透射电镜观察,在细胞核内查到大量病毒颗粒;用ELISA方法在REL病毒培养物中查到HCMV抗原,抗原滴度与HEL增殖的病毒一致;与HEL增殖物比较,经REL增殖的病毒培养物毒力降低100TCID50。表明REL是HCMVAD169毒株的敏感宿主细胞。 In order to investigate the sensitivity of HC16 strain in vitro to Rabbit Embryo Lung cells (REL) in order to explore the infection model of HCMVAD169 strain, HCMVAD169 strain was inoculated into REL quantitatively to observe the cell pathological changes. The intracellular HCMV antigen was detected by monoclonal antibody immunohistochemistry, the intracellular virus particles were detected by electron microscopy, the titer of HCMV antigen was detected by ELISA assay, the titer of virus was determined by human Embryo Lungcel (HEL) Variety. The results showed that, after inoculation of virus, REL appeared cell swelling in 48h, there were refraction particles in the cytoplasm, gradually rounded off, and its pathological features were consistent with the virus in HEL proliferation of lesions; immunohistochemistry in the cytoplasm And found in the nucleus HCMV antigen; observed by transmission electron microscopy, a large number of virus particles were found in the nucleus; detected by ELISA ELISA HCMV antigen in the culture of the virus, antigen titer and HEL proliferation of the virus; In comparison, virulence of virus cultures propagated via REL was reduced by 100 TCID50. REL is a sensitive host cell for the HCMVAD169 strain.
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