【摘 要】
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目的评价耐药相关基因pncA突变检测河南省耐多药结核病患者吡嗪酰胺耐药性的效果。方法收集2018年1月至12月于河南省10个结核病耐药监测地区就诊的152例耐多药结核病患者的痰标本。对患者进行问卷调查，收集年龄、性别、治疗史、痰培养等信息。最终将问卷及菌株标本送至河南省疾病预防控制中心进行后续研究。采用结核分枝杆菌液体培养进行吡嗪酰胺药物敏感试验。采用聚合酶链反应和基因测序鉴定pncA的突变情况，
【机 构】
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河南省疾病预防控制中心结核病防治所，郑州 450016;张国龙现在河南省疾病预防控制中心性病艾滋病防治所，郑州 450016,
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目的评价耐药相关基因pncA突变检测河南省耐多药结核病患者吡嗪酰胺耐药性的效果。
方法收集2018年1月至12月于河南省10个结核病耐药监测地区就诊的152例耐多药结核病患者的痰标本。对患者进行问卷调查，收集年龄、性别、治疗史、痰培养等信息。最终将问卷及菌株标本送至河南省疾病预防控制中心进行后续研究。采用结核分枝杆菌液体培养进行吡嗪酰胺药物敏感试验。采用聚合酶链反应和基因测序鉴定pncA的突变情况，并与标准菌株H37Rv的序列进行比较。分析吡嗪酰胺耐药表型与抗结核治疗效果的相关性。统计学分析采用χ2检验和独立样本t检验。
结果152株耐多药结核分枝杆菌菌株中，105株为吡嗪酰胺表型耐药菌株。对异烟肼、利福平、乙胺丁醇和链霉素全部耐药的菌株，以及准广泛耐药菌株和广泛耐药菌株对吡嗪酰胺的耐药率均较高，分别为80.39%(82/102)、81.13%(43/53)和92.59%(25/27)。102株菌株的pncA基因发生突变。以表型药物敏感试验结果为参照，pncA基因突变检测吡嗪酰胺耐药性的灵敏度为89.52%(95%可信区间81.64%～94.39%)，特异度为89.36%(95%可信区间76.10%～96.01%)。共存在100种不同类型的pncA突变，包括80种点突变和20种插入或缺失突变，其中有13株菌株存在多个位点突变。7株菌株pncA启动子发生突变，分别为-7G插入突变、-11T到C点突变和-12A到G点突变，3组菌株中pncA mRNA相对表达量分别为0.21±0.05、0.31±0.08和0.33±0.03，均低于标准株H37Rv(设置其pncA mRNA表达量为1.00)，差异均有统计学意义(t＝4.57、2.43、3.65，均P<0.05)。治疗后不同时间段吡嗪酰胺耐药患者和敏感患者的痰菌阴转率差异有统计学意义(χ2＝10.01，P＝0.02)，其中吡嗪酰胺耐药患者治疗6个月末的阴转率为1.08%(1/93)，而吡嗪酰胺敏感患者为7.14%(3/42)。
结论耐多药结核分枝杆菌呲嗪酰胺耐药与pncA基因突变相关，该突变散在分布且具有多样性。吡嗪酰胺耐药患者的痰菌阴转时间可能延长。
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