【摘 要】
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目的在用枯草杆菌质粒克隆并表达白喉毒素突变型DT-del148时,出现A700T突变,导致Ile209Leu氨基酸取代,为纠正这一突变,设计一种简便有效的枯草杆菌质粒克隆方法.方法首先对含
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
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目的在用枯草杆菌质粒克隆并表达白喉毒素突变型DT-del148时,出现A700T突变,导致Ile209Leu氨基酸取代,为纠正这一突变,设计一种简便有效的枯草杆菌质粒克隆方法.方法首先对含I209L突变的载体PSM604-DT-del148-I209L DNA进行计算机限制内切酶谱分析,以位于PflMⅠ及HindⅢ间的唯一切点的限制内切酶KpnⅠ消化,然后去磷酸化,热灭活相应酶,加入不含I209L突变的大肠杆菌质粒PET15b-DT-del148,再以PflMI、HindⅢ消化,浓缩后进行连接、转化、筛选
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