【摘 要】
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建立从猪眼晶状体中提取和一次过柱分离纯化波形蛋白(Vim)的工艺方法。以精提液溶解猪眼晶状体粗提粉,使用单因素实验及响应面分析对精提温度、时间、料液比、pH值四个因素进行
【机 构】
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武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉轻工大学医学技术与护理学院
【基金项目】
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湖北省自然科学基金(2015CFC845), 武汉轻工大学研究生创新项目(2013cx021)
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建立从猪眼晶状体中提取和一次过柱分离纯化波形蛋白(Vim)的工艺方法。以精提液溶解猪眼晶状体粗提粉,使用单因素实验及响应面分析对精提温度、时间、料液比、pH值四个因素进行优化,利用DEAE Sepharose FF阴离子交换柱分离纯化目标蛋白,以免疫印迹法鉴定波形蛋白,10%SDS-PAGE检测纯化Vim的纯度和相对回收率。精提的最佳工艺条件为:温度13.16℃,时间26.01 min,料液比1∶34(g∶m L),p H7.03。使用DEAE Sepharose FF柱以不少于40倍柱体积的36 mmo
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