【摘 要】
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为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载
【机 构】
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厦门海洋职业技术学院,国家海洋局第三海洋研究所,国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心,厦门大学,东山出入境检验检疫局综合技术服务中心
【基金项目】
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福建省科技计划项目(2017N0016);国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项资金资助项目(海三科2016031)共同资助
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为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载体pHT43-SUMO中,然后通过电转化法将重组质粒转入八种蛋白酶缺陷的宿主枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)WB800N中。SDS-PAGE电泳显示诱导表达的融合蛋白SUMO-Op-MT分子量约为23kD,与预期一致,说明可溶性融合蛋白SUMO-Op-MT在宿主菌中得到了表达,且通过Westernblott
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