【摘 要】
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目的建立新生小鼠心肌细胞(CM)的分离纯化、培养及鉴定的方法。方法采用酶消化法分离消化心室组织,差速贴壁法和化学方法纯化CM;培养7d后,利用免疫荧光技术和RT-PCR技术检测部
【机 构】
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青岛大学附属烟台毓璜顶医院检验中心
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目的建立新生小鼠心肌细胞(CM)的分离纯化、培养及鉴定的方法。方法采用酶消化法分离消化心室组织,差速贴壁法和化学方法纯化CM;培养7d后,利用免疫荧光技术和RT-PCR技术检测部分CM特异基因在蛋白和mRNA水平的表达;改进透射电镜的常规操作方法,观察CM超微结构。结果采用0.08%胰蛋白酶和0.04%胶原酶Ⅱ消化心室组织后,细胞成活率为98%,贴壁培养第3d出现同簇细胞的同步跳动;抗心肌肌钙蛋白(cTnT)免疫荧光染色阳性率为99.07%;以骨髓间充干细胞为阴性对照,RT-PCR结果显示CMα和β两型心
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