凝血因子V G1691A点突变的多聚酶链反应分析

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jjy2005
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为探讨抗活化的蛋白C(APCR)及其基因型在中国人血栓性疾病的发病情况,用活化的部分凝血活酶时间(APTT)以加和不加活化的蛋白C(APC)的比值(APC-SR)检测APCR;用多聚酶链反应扩增因子V第10外显子(包含506位密码子)的220bp片段,再用限制性内切酶Mnl Ⅰ消化检测其基因型。共检测了46例静脉血栓和下肢动脉血栓,58例心、脑梗塞,74例冠心病及40名正常人的APCR及其基因型。
为了进行血管性血友病因子(vWF)的基因重组及体外表达,采用高保真长逆转录-多聚酶链反应技术从人脐静脉血管内皮细胞总RNA中扩增出了5个相互重叠的DNA片段,并在体外将它们拼接。最终的拼接产物长8515bp,包含vWF cDNA编码区全长,经多种限制性内切酶酶切分析,酶切条带大小符合预期酶切谱。体外翻译实验表明该基因克隆具有正确的读框,在被转染的CHO细胞胞浆及培养上清中均可检测到vWF抗原的存在
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为研究阿斯匹林(ASA)对血栓形成的影响,应用氩离子激光诱导的大鼠微血管血栓形成模型,对不同剂量(100~10-60 mg/kg)的ASA作用进行了研究。结果发现,在大鼠体内ASA的作用呈现出剂量依赖性,在超低剂量用药(ASA 10-18、10-30、10-60 mg/kg)时,呈现出血栓数目增多、栓塞时间延长、血小板聚集试验的振幅和聚集速度增高。从而证实,超低剂量的ASA在大鼠体内可以促进血栓形
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