丁苯酞对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺功能及TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

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目的 探讨丁苯酞对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠肺功能及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)通路的影响.方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及丁苯酞低、中、高剂量组,对照组大鼠进行10 mL/kg生理盐水腹腔注射,模型组及丁苯酞低、中、高剂量组大鼠建立COPD模型,并分别进行10 mL/kg生理盐水及20、40、80 mg/kg丁苯酞腹腔注射.用药4周后,测定肺功能指标每0.3 s用力呼气量(forced expiratory volume in 0.3 second,FEV0.3)占用力肺活量(forced vital capacity,FVC)之比、动态顺应性(dynamic compliance,Cdyn)和呼气阻力(expiratory resistance,Re),酶联免疫(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-8水平,苏木素-伊红(Hematoxylin and Eosin,HE)染色观察肺组织病理学变化,采用蛋白印迹(western blot,WB)法检测肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白水平.结果 与对照组相比,模型组大鼠FEVJFVC(70.55+1.63)、Cdyn(0.32+0.02)降低,Re(9.23±0.66)及BALF中TNF-α(213.52±15.44)、IL-1β(102.85±3.18)、IL-8(162.58±9.38)水平升高,肺组织中TLR4(0.87±0.07)、MyD88(0.84±0.03)、p-NF-κB p65/NF-κB p65(0.93±0.06)蛋白水平升高(均P<0.05),并出现明显的COPD病理特征;与模型组相比,随着丁苯酞剂量的升高,COPD大鼠FEV0.3/FVC(74.08±1.57、76.77±1.41、80.68±1.76)、Cdyn(0.37±0.02、0.43±0.02、0.47±0.03)升高,Re(7.31±0.85、4.68±0.82、3.35±0.45)及BALF中TNF-α(183.25±17.59、152.44±14.25、128.67±13.48)、IL-1β(82.49±3.32、58.70±3.64、39.68±3.22)、IL-8(138.90±9.44、102.52±7.65、83.65±7.21)水平降低,肺组织中TLR4(0.76±0.05、0.60±0.07、0.41±0.05)、MyD88 (0.77±0.03、0.52±0.04、0.43 ±0.03) 、p-NF-κB p65/NF-κB p65 (0.84±0.05、0.62±0.06、0.45 ±0.03)蛋白水平降低(均P<0.05),且COPD各病理特征有明显改善.结论 丁苯酞能改善COPD大鼠肺功能,并抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路激活,降低炎症反应.
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