【摘 要】
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为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖效价,本研究旨在筛选出一株对该病毒易感度高的Marc-1
【机 构】
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云南农业大学动物医学院,云南昆明650201;云南省畜牧兽医科学院/云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室/农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室,云南昆明650224
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为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖效价,本研究旨在筛选出一株对该病毒易感度高的Marc-145细胞株.采用有限稀释法从母代细胞中分离单细胞克隆株,通过RT-PCR的方法测定毒株在克隆细胞上的核酸量,通过TCID50检测毒株对克隆细胞株的易感性,同时进行细胞生长曲线绘制.结果 表明,获得2-D4、2-E6、2-C8、2-G9、2-H11株共5株Marc-145克隆细胞.接毒72 h后,2-D4、2-E6、2-C8和2-H11株细胞出现明显细胞病变,2-G9株和母代细胞培养上清液核酸检测呈阳性,但未出现细胞病变.同时,2-D4株对PRRSV毒株高度易感,该克隆细胞的分裂增殖能力要强于其他克隆株.综合上述试验结果,2-D4株更适宜于PRRSV培养,因此采用有限稀释法筛选对PRRSV易感的Marc-145细胞是一种可行的科学研究方法.
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