香蕉线条病毒 MP 功能域基因的克隆、原核表达及抗血清制备

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xlq0225
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[目的]制备香蕉线条病毒广东分离物( BSV-GD) MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清,为BSV基因编码蛋白功能的研究提供条件.[方法]对BSV-GD ORF3基因氨基酸序列进行生物信息学分析,得出MP功能域基因序列,克隆该基因并插入载体pET-28b(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用超声波裂解法进行蛋白可溶性分析,利用组氨酸标签纯化试剂盒对目的融合蛋白进行纯化和回收,然后以纯化的目的蛋白为抗原免疫健康家兔制备其多克隆抗血清;通过Western-blot分析该抗血清的特异性,间接ELI
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