【摘 要】
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[目的]构建Nelin基因N端片段的原核表达载体并表达此蛋白.[方法]设计带有BamH I/EcoR I酶切位点的引物,以已构建好的质粒pGEX-5X-Nelin为模板,用PCR扩增Nelin基因N端片段,并
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[目的]构建Nelin基因N端片段的原核表达载体并表达此蛋白.[方法]设计带有BamH I/EcoR I酶切位点的引物,以已构建好的质粒pGEX-5X-Nelin为模板,用PCR扩增Nelin基因N端片段,并用BamH I/EcoR I酶切PCR产物和原核表达载体pGEX-5X-1,然后用T4 DNA连接酶将其连接,得到重组表达质粒pGEX-5X-Nelin-1,经双酶切鉴定和测序验证.重组表达质粒转化大肠杆菌BL 21,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,以SDS-PAGE进行分析.[结果]
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