【摘 要】
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从口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)细胞培养物中提取总RNA,经一步法RT-PCR获得了长约230 bp的3B基因片段,将PCR产物连接到pMD-18T载体上并测序,用BamH Ⅰ与Hi
【基金项目】
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国家重大科技专项-食品安全关键技术研究资助
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从口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)细胞培养物中提取总RNA,经一步法RT-PCR获得了长约230 bp的3B基因片段,将PCR产物连接到pMD-18T载体上并测序,用BamH Ⅰ与HindⅢ双酶切后,将3B基因融合到pGEX-KG载体上形成表达质粒pGEX-KG-3B,转化到BL21(DE3)中在27℃诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE和蛋白质斑点ELISA.结果表明3B基因主要以可溶形式高效表达,表达产物具有免疫原性.以纯化的表达产物为抗原建立了间接
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