Thermotoga neapolitana葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及其酶学性质

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwe6367
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目的:从新阿波罗栖热袍菌Thermotoga neapolitana(DSM4359)中克隆葡萄糖苷酶基因,并将其转化进大肠杆菌中进行体外表达,研究重组酶的酶学性质。方法:以Thermotoga neapolitana基因组DNA为模板,根据该基因序列设计引物,采用PCR法扩增出葡萄糖苷酶基因,将其连接到pET-28a(4-)载体上,转化入E.coli BL21(DE3)宿主菌中。经IPTG诱导体外高效表达。研究重组酶的最适反应温度、pH值和底物特异性。结果:PCR扩增得到825bp的片段,编码274个氨
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