p α-MHC/EGFP小鼠胚胎干细胞株的构建及其向心肌细胞分化的观察

来源 :上海交通大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qnmdmmmm

【摘要】

：

目的构建含有心肌特异性基因肌球蛋白重链α（α-MHC）调控的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达的载体并转染到小鼠胚胎干细胞（ESC）,建立p α-MHC/EGFP小鼠ESC株,利用该细胞株可识别和纯

【作者】

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王治戴秋艳吴亚兰徐国彤李令杰孙宝贵

【机构】

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上海交通大学第一人民医院心内科,中国科学院上海生命科学研究院／上海交通大学医学院健康科学研究所干细胞重点实验室

【出处】

：

上海交通大学学报：医学版

【发表日期】

：

2008年8期

【关键词】

：

胚胎干细胞绿色荧光蛋白转染心肌细胞分化小鼠 embryonic stem cellsgreen fluorescent proteintransfec

【基金项目】

：

上海市科委基金（03DJ14019）

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目的构建含有心肌特异性基因肌球蛋白重链α（α-MHC）调控的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达的载体并转染到小鼠胚胎干细胞（ESC）,建立p α-MHC/EGFP小鼠ESC株,利用该细胞株可识别和纯化分化形成的心肌细胞。方法应用电穿孔技术将pα-MHC/EGFP载体转染到ESC,G418筛选10-12d后收集G418抗性细胞克隆并采用悬滴法体外诱导向心肌分化。通过PCR扩增细胞克隆基因组EGFP片段,并在心肌分化过程中通过荧光显微镜观察EGFP的表达,鉴定pα-MHC/EGFP胚胎干细胞株的建立。细胞免疫

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