【摘 要】
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目的运用基因芯片技术构建快速简便检测B19细小病毒的方法,用于B19病毒的大规模筛查和早期诊断。方法利用Oligo6.0和primer5.0软件分别设计出5对引物(其中每对引物中的1个用C
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目的运用基因芯片技术构建快速简便检测B19细小病毒的方法,用于B19病毒的大规模筛查和早期诊断。方法利用Oligo6.0和primer5.0软件分别设计出5对引物(其中每对引物中的1个用Cy5标记)和6个探针,将探针固定在特制的醛基检测芯片上。分别提取B19病毒全基因组质粒、患者组血清、正常组血清的DNA,进行不对称扩增,产物与芯片杂交,观察结果;DNA测序验证芯片检测结果的准确性;观察等倍稀释不对称PCR扩增产物杂交信号的强度变化,检测芯片的灵敏度。结果电泳结果表明PCR扩增获得的DNA片段和预期表达片段大小一致。芯片杂交结果和DNA测序验证结果完全吻合,芯片杂交信号的强弱会随着DNA浓度的降低而减弱。结论本研究建立了细小病毒B19的芯片检测方法,该方法并具有较高的灵敏度和特异性。
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