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目的：构建人PKM2（M2-typepyruvate kinase）的原核表达质粒，并在大肠杆菌中表达，镍离子柱亲和层析法纯化融合蛋白。方法：用PCR方法从宫颈癌Hela细胞全基因组中扩增出目的基因PKM2，通过克隆载体pET30a（＋）构建质粒载体pET30a（＋）-PKM2。经双酶切和DNA测序证实正确后，用Mi-NTA亲和层析柱进行纯化。结果：双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符，测序结果和报道一致。经SDS—PAGE分析，纯化后的蛋白约在58KDa位，条带单一，无杂带出现。结论：成功表达纯化了P