【摘 要】
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本研究针对鲤浮肿病病毒(carp edema virus,CEV)基因组核蛋白编码基因P4a的序列,设计2对特异性引物,以克隆构建的重组质粒为标准模板,通过优化反应体系中引物浓度组合、Mg2+
【机 构】
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水产科学国家级实验教学示范中心(上海海洋大学),中国水产科学研究院长江水产研究所
【基金项目】
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国家大宗淡水鱼产业技术体系专项资金项目(CARS-45-16);中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2017HYZD1005);湖北省科技支撑计划项目(2015BBA234)
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本研究针对鲤浮肿病病毒(carp edema virus,CEV)基因组核蛋白编码基因P4a的序列,设计2对特异性引物,以克隆构建的重组质粒为标准模板,通过优化反应体系中引物浓度组合、Mg2+浓度、dNTPs浓度、反应温度和扩增时间等参数,建立了CEV环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。结果表明,CEV-LAMP方法的最佳反应温度为62℃,引物浓度组合为引物F3/B3 0.2μmol/L,引物FIP/BIP 1.2μmol/L,
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