纤溶酶-α2-抗纤溶酶复合物单克隆抗体的制备及其应用

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目的:制备纤溶酶-α2-抗纤溶酶复合物(plasmin-α2-antiplasmin complex,PAP)的单克隆抗体并建立其酶免疫检测方法。方法:从人血浆中提纯的PAP作为免疫原制备特异性单克隆抗体,通过双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)对该单克隆抗体应用价值进行评估。结果:获得特异针对PAP新抗原的单抗3C10和针对PAP及纤溶酶原(Plg)的单抗2B9,效价均为1.25X10-6,其对PAP的亲和常数分别为4.69x10-10M和5.62X10-9M。以此建立的双抗体夹心ELISA检测PAP在0~160ng/ml范围内呈良好的线性关系,批内CV<7%,检测敏感度为5ng/ml,与AD公司的PAP试剂盒相关性良好(r=0.9629)。结论:本法可应用于临床评估纤溶系统的激活状态。
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