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目的:研究siRNA对HepG2细胞株cyclinE表达的抑制及细胞生长的影响,并用双向凝胶电泳和质谱技术分析鉴定转染前后细胞内差异表达的蛋白质。方法:构建质粒表达载体pU6-cyclinE—shRNA,稳定转染肝癌HepG2细胞株,获得HepG2-cyclinEshRNA细胞系,RT—PCR检测cyclinEmRNA表达,MTT测定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期。裂解、抽提HepG2-cyclinEshRNA细胞和G1期肝癌HepG2细胞全蛋白,用双向电泳技术进行分离后,用Proxpress2D