马铃薯X病毒外壳蛋白基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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采用RT-PCR技术从感染马铃薯X病毒贵州分离物PVX-GZ的普通烟叶片中扩增出该病毒的外壳蛋白基因CP。测序结果表明,该CP基因全长714 bp,编码237个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-CP,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25 ℃条件下以0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thivgalactopyranoside,简称IPTG)诱导表达重组蛋白基因;SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为45 ku;以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白
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