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探究生长特异抑制物5(lncRNA growth arrest-specific 5, lncRNA GAS5)通过靶向调控miR-223的表达对结肠癌细胞的放射敏感性的影响。
方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测多种结肠癌细胞系中lncRNA GAS5的表达量,选择表达量较低的作为后续研究对象;细胞克隆实验检测过表达lncRNA GAS5对结肠癌SW480细胞放射敏感性的影响;通过生物信息学数据库starBase以及双荧光素酶报告基因实验预测以及验证lncRNA GAS5的靶基因miR-223;qPCR检测miR-223在多种结肠癌细胞系中的表达量,以及过表达lncRNA GAS5对SW480细胞中miR-223表达量的影响。
结果与人正常结肠上皮细胞(NCM460)相比,lncRNA GAS5在结肠癌SW480、LOVO、HT-29、SW620细胞系中的表达量显著降低(t=15.25、8.69、14.42、11.62,P<0.05),其中在SW480细胞中的表达量最低;过表达lncRNA GAS5或者下调miR-223显著降低细胞的存活分数(8 Gy时lncRNA GAS5:t=13.51,P<0.05;anti-miR-223:t=14.93,P<0.05),促进凋亡(lncRNA GAS5:t=8.30,P<0.05;anti-miR-223:t=7.32,P<0.05),增加结肠癌细胞放射敏感性;生物信息学分析显示,lncRNA GAS5 3′端序列中包含与miR-223的结合位点,过表达/下调lncRNA GAS5后,miR-223的表达量下降/上升。
结论lncRNA GAS5通过靶向调控miR-223的表达促进结肠癌细胞凋亡、抑制其存活,从而提高结肠癌细胞的放射敏感性。