【摘 要】
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探索一种新的快捷有效DNA免疫制备单克隆抗体的方法，辅助实现构建高通量无蛋白纯化体系单克隆抗体制备和筛选。分别通过“重叠PCR”和“无模板PCR”在pVAX1真核载体中分别引入
【基金项目】
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国家科技攻关计划项目(No2004BA711A20)~~
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探索一种新的快捷有效DNA免疫制备单克隆抗体的方法，辅助实现构建高通量无蛋白纯化体系单克隆抗体制备和筛选。分别通过“重叠PCR”和“无模板PCR”在pVAX1真核载体中分别引入IL-2信号肽、IgGkappa链信号肽构建分泌型真核表达载体，将代表抗原基因的profilin1基因克隆到经改造带有信号肽基因的表达载体上，构建重组质粒pVAX—IL2-profl和pVAX-Igtc-profl，单次脾内注射重组质粒DNA免疫BALB／c小鼠。经过细胞融合、ELISA筛选，获得两株抗profilin1的单克隆抗体
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