【摘 要】
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目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)能否通过转化生长因子-B1(TGF-61)/信号传导与转录激活因子-3(STAT3)信号通路对恶性黑素瘤上皮-间质转化(EMT)产生影响。方法采用倒置相差显微镜观察不同浓度的EGCG(5、25、50mg/L)对TGF.p1(5ug/L)刺激的B16黑素瘤细胞作用24h后细胞形态、迁移能力和侵袭力变化。Westernblot法检测细胞磷酸化STAT3(p
【机 构】
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武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,430022,武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科,430022,武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科,430022,武汉华中科技大学同济
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目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)能否通过转化生长因子-B1(TGF-61)/信号传导与转录激活因子-3(STAT3)信号通路对恶性黑素瘤上皮-间质转化(EMT)产生影响。方法采用倒置相差显微镜观察不同浓度的EGCG(5、25、50mg/L)对TGF.p1(5ug/L)刺激的B16黑素瘤细胞作用24h后细胞形态、迁移能力和侵袭力变化。Westernblot法检测细胞磷酸化STAT3(p-STAT3)及E-钙黏蛋白(E—cadhefin)的表达。建立B16肿瘤动物模型,逆转录-聚合酶链反应(1it.PCR)检测各组瘤组织E-cadheinmRNA表达。结果(1)TGF—Bl(5ug/L)刺激B16细胞后细胞间连接不紧密,形态为长梭形,不同浓度EGCG(5、25、50mg/L)作用于TGF-61(5ug/L)刺激B16细胞24h后细胞连接较为紧密,且随浓度增加改变更加明显,细胞划痕间距逐渐增大,Transwell小室检测穿膜数依次为97.00±9.97、60.30±4.00、38.75±7.18,侵袭力与EGCG浓度呈负相关(r=-0.92,P〈0.05)。(2)不同浓度EGCG刺激组p-STAT3的表达逐渐降低,E—cadhefin表达逐渐升高,且呈浓度依赖性,p-STAT3与E.Cadhefin表达亦呈负相关(r=-0.805,P〈0.05)。(3)EGCG干预后肿瘤组织中E.cadheinmRNA水平明显增加,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论EGCG具有明显抑制B16细胞EMT作用,其机制与抑制TGF-B1/STAT3信号通路相关。
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